1、真菌(1-3)-b-D葡聚糖检测(G试验)
1.1动态观察
检测真菌细胞壁(1-3)-b-D葡聚糖,可用于动态随访疾病的变化,(1-3)-b-D葡聚糖水平高低能够提示疾病的发展和预后。(1-3)-b-D葡聚糖水平在确诊侵袭性真菌患者的血清中出现持续升高,而随着药物的使用,对药物敏感者可很快出现(1-3)-b-D葡聚糖水平下降及转阴,而药物治疗无效人群(1-3)-b-D葡聚糖值无明显改变。
1.2结果解读
1.2.1试验干扰因素
1.2.1.1假阳性因素
⑴应用纤维素膜进行血液透析患者,
⑵标本接触纱布或其他含有葡聚糖的材料
⑶操作者处理标本存在污染
⑷静脉输注白蛋白、凝血因子、免疫球蛋白或血液制品
⑸某些细菌败血病患者(尤其是链球菌败血症)
⑹使用多糖类(香菇多糖、裂殖菌多糖)抗肿瘤类药物
⑺食用蘑菇类食物
⑻服用磺胺类药物、阿莫西林/克拉维酸、头孢类药物、多粘菌素、厄他培南也会引起不同程度的假阳性
1.2.1.2假阴性因素
⑴检测隐球菌和接合菌(犁头霉、毛霉、根霉)感染
⑵对于某些近平滑念珠菌感染的患者
⑶抗原-抗体免疫复合物形成
⑷抗真菌药的使用,如卡泊芬净,能非竞争抑制BG合成
⑸标本放置时间过长,待测物发生变化或降解(一般不超过6小时)
⑹局灶性真菌病,BG很少释放入血。
2、曲霉菌血清学试验(GM试验)
2.1感染意义
GM试验主要针对于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。检测曲霉菌细胞壁半乳甘露聚糖。曲霉菌感染部位主要集中在肺部,从而引起肺部侵袭性曲霉,诊断曲霉菌在肺部是定植还是侵袭性生长,关键在于其是否合成GM。如果痰液或肺泡灌洗液标本培养到曲霉菌且GM试验检测结果为阳性,即可诊断为曲霉菌侵袭性感染。GM试验常可在患者临床症状出现前5-8d获得阳性结果,并可对血清、脑脊液、肺泡或支气管灌洗液进行检测,因而往往可以使诊断提前。所以GM试验是诊断侵袭性曲霉感染的微生物检查证据之一,通过检测GM值也可以作为治疗效果的参考指标之一。
2.2影响因素
GM试验对其他真菌检测无效,且敏感性和特异性受诸多因素影响,以下情况可出现假阳性:(1)使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦;(2)新生儿和儿童;(3)血液透析;(4)自身免疫性肝炎等;(5)食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情况可出现假阴性:(1)释放入血循环中的曲霉GM(包括甘露聚糖)并不持续存在而是会很快清除;(2)以前使用了抗真菌药物;(3)病情不严重;(4)非粒细胞缺乏的患者。
G试验和GM试验联合检测的意义
种属
G试验
GM试验
念珠菌属
+
—
镰刀菌属
+
—
隐球菌属
—
+
曲霉菌属
+
+
青霉菌/拟青霉菌
+
+
接合菌纲
—
—
2.3临床应用注意
(1)G试验和GM试验检测的物质不同,代谢规律存在差异,影响因素也有较大差别,二者不能互相取代。二者联合应用可以提高对侵袭性真菌病的诊断能力。
(2)GM试验和G试验均存在假阳性结果,可以通过多次检测来降低假阳性率。因此,G试验和GM试验阳性的病例仍需结合临床表现综合判断是否存在真菌感染。
(3)我国的侵袭性真菌病指南把连续2次GM阳性作为微生物感染的标准,临床上经验性治疗早期应用,会使血清GM浓度降低,出现假阴性,连续2次血清GM阳性的标准不易达到,会给临床医生带来困惑。
(4)影响GM试验结果最常见的因素为β-内酰胺类抗菌药物的使用,尤其是哌拉西林/他唑巴坦,因此在检测曲霉菌半乳甘露聚糖时,应避免给患者使用此类药物。
3、开立医嘱
真菌感染两项,建议同时开两项。
4、标本采集要求
使用无热源专用采血管(短红帽),采集清晨空腹静脉血2ml~4ml;肺泡灌洗液,标本采集后送到检验科微生物实验室。
5、报告时间
周一、三、五下午报告结果(标本截止8:30)。(同时检测真菌感染两项时,可抽取一支试管的血样。)
根据临床的需求念珠菌及丝状真菌的药敏实验也将陆续开展。敬请期待!
不明之处,请致电检验科微生物室,外线:
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