其他革兰阴性杆菌: ◆一些无动力,无芽胞,菌体小,形态近似球杆菌,对营养要求较苛刻的小杆菌。 ◆主要包括嗜血杆菌属、鲍特菌属、布鲁菌属等。 一、嗜血杆菌属 ◆一类无动力、无芽胞的革兰阴性小杆菌,常呈球杆状,有时呈杆状、长丝状等多形态。 ◆与临床有关的为9个种,即流感、副流感、溶血、副溶血、嗜沫、副嗜沫、杜克及埃及嗜血杆菌。 ◆人工培养基中加入新鲜血液才能生长,故称嗜血杆菌。 (二)流感嗜血杆菌 简称流感杆菌,不是流感的病原菌。 1.生物学性状 (1)形态与染色: ◆急性感染标本,如脑脊液中多为短小球杆菌,恢复期病灶或长期人工传代培养呈球杆状、长杆状、丝、状等多形态性。 ◆G-,着色较浅。石碳酸复红或美蓝单染色,两端浓染现象。 ◆毒力株(粘液型菌株)在营养丰富的培养基上,6~8h有明显荚膜,在陈旧培养物中荚膜消失。 ◆无鞭毛,无芽胞。 (2)培养特性: ◆需氧菌。初次分离培养时,最好在5%~10%C02环境中,以促进其生长。 ◆普通培养基中须加入X和V因子,才能生长。 ◆巧克力琼脂平板上生长较佳:圆形、光滑、湿润、边缘整齐,呈露滴状的小菌落。48h后可形成直径1.0~1.5mm灰白色较大的菌落。有荚膜菌株的菌落呈轻度粘稠。 ◆卫星现象:有助于对流感嗜血杆菌的鉴定。 当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上共同培养时,由于后者能合成较多的V因子,可促进流感嗜血杆菌的生长,在葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落较大,离葡萄球菌菌落越远的菌落越小。 ◆液体培养基中:有荚膜的菌株呈均匀混浊生长,无荚膜的R型菌株则为颗粒状沉淀生长。 (3)生化反应: ◆对糖发酵不稳定。一般分解葡萄糖只产酸,不分解乳糖或甘露醇,对麦芽糖、蔗糖或糊精的发酵不稳定。 ◆还原硝酸盐。有荚膜菌株产生吲哚。典型菌株不溶血。产生自溶酶,可被胆汁溶解。 2.致病性 ◆致病物质为内毒素、荚膜、菌毛和酶类。 ◆通过呼吸道感染,引起原发性或继发性感染。 ◆原发性感染多由b型荚膜强毒株引起,为急性化脓感染,如脑膜炎、鼻咽炎、咽喉会厌炎、化脓性关节炎、心包炎及败血症等。 ◆继发感染主要在流感、麻疹、百日咳、肺结核等后发生,多为无荚膜菌株引起。如慢性支气管炎、中耳炎、鼻窦炎等。 3.微生物检验 如何提高流感嗜血杆菌的阳性率: ①初次培养应在50%~10%CO2环境。 ②生长需要X、V因子,故在培养基中应添加此因子。 ③应用选择性培养基,如巧克力琼脂中加一定量抗生素,嗜血杆菌分离率可达96.7%。 (三)其他嗜血杆菌
菌种
Ⅹ
Ⅴ
溶血性
致病性
流感嗜血杆菌
+
+
-
原发性化脓性感染及继发性感染等
副流感嗜血杆菌
-
+
-
偶可引起细菌性心内膜炎、尿道炎
埃及嗜血杆菌
+
+
-
急性、亚急性眼结膜炎
杜克嗜血杆菌
+
-
+/-
软性下疳
嗜沫嗜血杆菌
+
-
-
偶引起细菌性心内膜炎或脑脓肿
溶血性嗜血杆菌
+
+
+
很少致病
二、军团菌属 1.命名和分类 ◆年在美国费城召开的全美退伍军人会议期间,暴发流行一种严重肺炎,与会者人,有34人死亡。从死者肺组织中分离到一种新菌,年美国疾病控制中心将其命名为军团菌。 ◆《伯杰系统细菌学手册》()定为军团菌科,军团菌属。从人体分离的已有19种,其中主要致病菌为嗜肺军团菌。 2.生物学性状 ◆G-杆菌,常规染色不易着色,有端生或侧生鞭毛。 ◆需氧菌。含有2.5~5%CO2环境中生长良好。 ◆营养要求较苛刻,且生长缓慢,初次分离需L-半胱氨酸,培养基中含铁盐可促进生长。 ◆活性碳-酵母浸出液琼脂(BCYE)培养基:3~5天形成1~2mm圆形凸起,灰白色有光泽的菌落。 ◆触酶阳性,部分菌株氧化酶阳性,不分解糖类,多数菌株产β-内酰胺酶。 ◆具有O、H抗原,H抗原无特异性,O抗原具有特异性。 ◆自然界广泛存在,人工管道的水源中常存在此菌,如医院空调冷却水中常有此菌,对常用化学消毒剂敏感。 3.微生物检验 ◆直接涂片意义不大。 ◆分离培养后的菌落进行革兰染色镜检,进行氧化酶和触酶试验,明胶液化试验及β-内酰胺酶试验。 ◆利用PCR技术及荧光抗体染色进行鉴定。 ◆临床上常利用血清学诊断方法检测军团菌抗体IgG、IgM。有交叉反应,应引起注意。 4.临床意义 ◆引起军团病,主要由嗜肺军团菌,轻症型类似流感,病人有发烧、头痛、无力等症状。重症型是以肺部感染为主要特征,常导致多器官损害,最终导致呼吸衰竭死亡。 5.结果评价及治疗原则 ◆呼吸道标本中分离出军团菌,应确定为军团菌感染 ◆一般治疗方案为大环内酯类加利福平。 三、鲍特菌属 ◆G-小杆菌 ◆营养要求很高,血平板及巧克力平板不生长,常用鲍-金培养基进行分离培养。 ◆不发酵糖类,不产生H2S、吲哚,不液化明胶,不能还原硝酸盐,不能利用枸橼酸盐。 ◆该菌抵抗力弱,56℃30分钟、日光照射1小时可致死亡。 ◆毒素:即百日咳毒素、丝状血细胞凝集素和腺嘌呤环化酶毒素。 ◆百日咳鲍特菌和副百日咳鲍特菌是百日咳的病原菌。 ◆主要通过飞沫经呼吸道传播,引起百日咳。传染源主要是早期患者和带菌者。主要症状为阵发性剧烈咳嗽。由于病程较长,故名百日咳。 ◆病后或预防接种后,可获得持久免疫力,再次感染少见。气管粘膜局部的sIgA抗感染作用重要。 四、布鲁菌属 生物学性状: ◆G-小杆菌或球杆菌,无动力,无芽胞和荚膜。 ◆需氧,对营养要求较高,在血琼脂平板上培养5~7天可形成微小、灰色不溶血菌落。 ◆利用葡萄糖等糖类,尿素酶阳性,硝酸盐还原试验阳性。 检测:凝集反应,PCR检测,抗体检测。 临床意义:人畜共患感染性疾病的病原菌,布鲁菌可通过人类疫肤、呼吸道和消化道进入人体而感染,进入人体后首先侵犯局部淋巴结,之后入血,再进入肝、脾、骨髓等器官,患者热型呈波浪热。 治疗:首选多西环素,次选TMP/SMZ,用药需4~6周。 五、弗朗西斯菌属 主要有土拉弗朗西斯和新凶手弗朗西斯菌,是野生动物的自然疫源性疾病,人类多由于接触患病动物而感染。
朱世良多谢您的支持与鼓励??