巴氏杆菌科及相关属
巴氏杆菌科包括巴氏杆菌属、嗜血杆菌属和放线杆菌属等。近年来，由于DNA杂交、16SrRNA序列分析等分子生物学技术的应用，巴氏杆菌属分出新建立的曼氏杆菌属和里氏杆菌属，从嗜血杆菌属分出嗜组织杆菌属和泰勒菌属。
一、巴氏杆菌属
巴氏杆菌属的细菌已报道有20多种，其中，多杀性巴氏杆菌是最重要的畜禽致病菌。
多杀性巴氏杆菌
多杀性巴氏杆菌是引起多种畜禽巴氏杆菌病的病原体，主要使动物发生出血性败血病或传染性肺炎。在同种或不同动物间可相互传染，也可感染人，大多因被动物咬伤所致。
1.形态与染色呈细小球杆状，为革兰氏阴性菌，两端钝圆，单个存在，有时成双排列。新分离的细菌有微荚膜，在动物血液和脏器中的细菌，经瑞氏染色或美蓝染色呈明显的两极着色。无鞭毛，不形成芽孢。
2.培养及生化特性需氧或兼性厌氧菌，营养要求较高，普通培养基中生长差。在麦康凯培养基上不生长。在血琼脂平板上长成露滴样小菌落，不溶血。在血清肉汤中培养开始轻微混浊，4?6d后液体变清，液面形成菌环，管底出现黏稠沉淀。从病料新分离的强毒菌株具有荚膜。菌落为黏液型，较大。
培养48h可分解葡萄糖、果糖、蔗糖、甘露糖和半乳糖，产酸不产气。大多数菌株可发酵甘露醇、山梨醇和木糖。一般对乳糖、鼠李糖、水杨苷、肌醇、菊糖、侧金盏花醇不发酵。可形成靛基质。触酶和氧化酶试验均为阳性，甲基红试验和VP试验均为阴性，石蕊牛乳无变化，不液化明胶，产生硫化氢和氨。
3.致病性及毒力因子
(1)致病性对鸡、鸭、鹅、野禽，猪、牛、羊、马、兔等都可致病，急性型呈出血性败血症，迅速死亡，如牛出血性败血症、猪肺疫、禽霍乱、兔巴氏杆菌病等；亚急性型呈出血性炎症，见于黏膜关节等部位；慢性型呈萎缩性鼻炎（猪、羊）关节炎及局部化脓性炎症等。实验动物中小鼠极易感染，鸽对杀禽亚种的易感性强。
(2)相关毒力因子具有荚膜的菌株有较强的抗性，荚膜成分为透明质酸，有抗吞噬作用。杀禽亚种的致病力与菌体的内毒素有关。该内毒素是一种含氮的磷酸脂多糖，与菌体结合不紧密，用福尔马林盐水可洗脱，少量注入鸡体，即可引致禽霍乱，表现出血性败血症状。
4.微生物学诊断
(1)显微镜检查采取渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等新鲜病料涂片或触片，以碱性美蓝液或瑞氏染色液染色，显微镜检查，如发现典型的两极着色的短杆菌，结合流行病学及剖检，可做初步诊断。
(2)分离培养慢性病例或腐败材料不易发现典型菌体，必须进行培养和动物试验。可用血琼脂分离培养，疑似菌落再接种于三糖铁培养基，细菌生长，使底部变黄。必要时可进一步做生化反应进行鉴定。
(3)动物试验用病料悬液或分离培养菌，皮下注射小鼠、家兔或鸽，动物多在24?48h内死亡。参照患畜的生前临床症状和剖检变化，结合分离菌株的毒力试验作出诊断。
(4)血清型学鉴定若要鉴定荚膜抗原和菌体抗原型，则要用抗血清或单克隆抗体进行血清学试验。检测动物血清中的抗体，可用试管凝集试验、间接凝集试验，琼脂扩散试验或酶联免疫吸附试验（ELISA)。
二、里氏杆菌属
鸭疫里氏杆菌是里氏杆菌属的代表种；原名鸭疫巴氏杆菌，是雏鸭传染性浆膜炎的病原菌。
鸭疫里氏杆菌
1.形态与染色菌体呈杆状或橢圆形，大小为（0.3?0.5)um×（0.7?6.5)um，偶见个别长丝状，长11?24um。多为单个，少数成双或短链排列。可形成荚膜，无芽孢，无鞭毛。瑞氏染色可见两极着色。革兰氏染色阴性。
2.培养及生化特性营养要求较高，普通培养基和麦康凯培养基上不生长。初次分离培养需要供给5%?10%的CO2。在巧克力或胰蛋白胨大豆琼脂（TSA)平板上，CO2培养箱或蜡烛缸中，37℃培养24?48h，生长的菌落无色素，呈圆形，表面光滑，直径1?2mm。在含血清或胰蛋白胨酵母的肉汤中，37℃培养48h,呈上下一致轻微混浊，管底有少量沉淀。不发酵葡萄糖、蔗糖，可与多杀性巴氏杆菌相区别。极少数菌株发酵麦芽糖或肌醇。靛基质、硝酸盐还原、柠檬酸盐利用、VP试验、甲基红试验、硫化氢产生、尿素分解等均为阴性。氧化酶、触酶试验为阳性。多不溶血，多液化明胶，（G+C)mol%多为35。
3.致病性及毒力因子鸭疫里氏杆菌可引起1?8周龄，尤其是2?3周龄雏鸭大批发病、死亡，生长发育严重受阻。兔和小鼠不易感。豚鼠腹腔注射大量细菌可致死。vapl基因的编码产物是可能的毒力因子，为cAMP协同溶血素，存在于1、2、3、5、6及19型菌株。
4.微生物学诊断取发病初期病鸭的脑及心血，用巧克力培养基容易分离到本菌。肝、脾分离率低，仅10%左右。分离时应同时接种麦康凯培养基，以便及时区别大肠杆菌。分离的细菌应进行葡萄糖和蔗糖发酵试验，也可接种小鼠，与多杀性巴氏菌相区别。PCR方法可用于快速诊断。
三、嗜血杆菌属
嗜血杆菌属是一群酶系统不完全的革兰氏阴性杆菌，生长需要血液中的生长因子，尤其是X因子和V因子，人工培养时必须供给新鲜血液，故名嗜血杆菌。嗜血杆菌存在于人和动物的呼吸道黏膜，常分离自人和动物的各种病灶和分泌物。
副猪嗜血杆菌
副猪嗜血杆菌可引起猪的格氏病（Glaessersdisease)，是目前养猪生产中重要的细菌性呼吸道疾病。根据热稳定抗原的差异，可分为至少15个血清型，约25%的分离株无法定型。目前的优势菌型为4型及5型。不同血清型菌株的毒力存在差异，1、5、10、12、13及14型为高毒力，2、4、15为中毒力，其他血清型视为无毒力。同一血清型的不同菌株毒力也有所不同。
1.形态与染色多为短杆状，也有呈球状、杆状或长丝状等多形性。大小为1.5um×(0.3?0.4)um。多单个存在，也有短链排列。无鞭毛，无芽孢。新分离的致病菌株有荚膜，美蓝染色呈两极浓染，革兰氏染色为阴性。
2.培养及生化特性需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃，最适pH7.6?7.8。初次分离培养时供给5%?10%CO2可促进生长。生长需供给X因子和V因子。在巧克力琼脂上，经37℃培养24?48h，生长的菌落呈圆形、表面光滑、边缘整齐、灰白色、半透明。菌落的大小可因菌种和培养基的营养程度不同而异，从针尖大直至绿豆大小。对糖类发酵多不稳疋。
3.致病性及毒力因子副猪嗜血杆菌存在于猪的上呼吸道，猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型感染造成的免疫抑制可加剧其感染，成为常见的继发病。疾病的临床特征表现为高热、关节肿胀、呼吸道紊乱及中枢神经症状。严重者剖检可见多发性浆膜炎，包括心肌炎、腹膜炎、胸膜炎、脑膜炎及关节炎。10日龄以下仔猪往往从带菌母猪感染。断奶猪较易发病，应激因素常是发病的诱因。此外，副猪嗜血杆菌常与猪流感病毒共感染引起猪流感。
副猪嗜血杆菌的毒力因子不完全清楚，其毒力因子可能为荚膜、菌毛和内毒素等。
4.微生物学诊断副猪嗜血杆菌对培养条件要求高，可用胰蛋白胨大豆琼脂（TSA)平板进行分离培养。可采用PCR方法直接检测病料中的细菌。
四、放线杆菌属
放线杆菌属包括猪胸膜肺炎放线杆菌、林氏放线杆菌、驹放线杆菌等若干种。猪胸膜肺炎放线杆菌是猪的重要致病菌。
猪胸膜肺炎放线杆菌
猪胸膜肺炎放线杆菌过去列在嗜血杆菌属内，旧称猪胸膜肺炎嗜血杆菌或副溶血嗜血杆菌，但DNA杂交试验表明，它与林氏放线杆菌有很高的同源性，因此，自年起改为现名，并划归放线杆菌属。其所引起的猪传染性胸膜肺炎是规模化猪场常见的疾病之一。
1.形态与染色小球杆菌，具多形性。新鲜病料呈两极染色，有荚膜和鞭毛，具运动性。
2.培养及生化特性兼性厌氧，置10%CO2中可长出黏液性菌落。最适生长温度37℃。在普通营养基中不生长，需添加V因子，常用巧克力培养基培养。在绵羊血平板上，可产生稳定的β溶血，金黄色葡萄球菌可增强其溶血圈（CAMP试验阳性）。
3.致病性及毒力因子
(1)致病性猪是本菌高度专一性的宿主，本菌寄生在猪肺坏死灶内或扁桃体，较少在鼻腔。引起猪的高度接触传染性呼吸道疾病，以纤维素性胸膜炎和肺炎为特征。慢性感染猪或康复猪成为带菌者。小于6月龄的猪最易感，经空气传染或猪与猪直接接触传染。应激可促使发病。
(2)毒力因子本菌的毒力因子较复杂。荚膜有抗吞噬作用，但如存在特异的调理素抗体，则可被吞噬细胞消化。脂多糖是典型的内毒素，能致肺部炎性细胞渗出，但不足以诱发胸膜肺炎的特征性病变。
毒素是本菌最重要的毒力因子。不同血清型的菌株可产生4种细胞毒素，名为ApxⅠ?Ⅳ具有细胞毒性或溶血性，是一种穿孔毒素，属于含重复子毒素家族，似通过转座作用获得。其Ⅲ型与大肠杆菌α-溶血素有相同的操纵子编码基因。Ⅳ型毒素存在于所有血清型，但只在猪体内才产生。
4.微生物学诊断
(1)显微镜检查取病死猪肺坏死组织、胸水、鼻及气管渗出物做涂片，镜检是否有革兰氏阴性两极染色的球杆菌。
(2)分离培养与鉴定取上述病料接种巧克力琼脂或绵羊血琼脂，置5%CO2中37℃过夜培养。如有溶血小菌落生长，应进一步做CAMP试验，检测其脲酶活性及甘露醇发酵能力。用琼脂扩散试验或直接凝集试验鉴定分离菌株的血清型。
(3)基因检测采用PCR方法检测荚膜基因，可用于快速诊断和定型。
